操作流程 收集基因信息——>设计引物——>PCR ——>回收目的片段——>与载体连接,取得连接产物 ——> 用感受态细胞做转化 ——>接菌——>阳性克隆(酶切法或PCR)——>质粒抽提——>质粒测序——>测序结果分析——>克隆信息输入数据库——>质粒实物保存。

产品名称

英文名称

规格

马虻PCR检测试剂盒

Gasterophilus spp.PCR

50T

PCR实验方法步骤： 方法 1：在冰浴中，按以下次序将各成分加入一无菌0.5ml离心管中。 10×PCR buffer 5 μl     dNTP mix （2mM） 4 μl     引物1（10pM） 2 μl     引物2（10pM） 2 μl     Taq酶 （2U/μl） 1 μl     DNA模板（50ng-1μg/μl） 1 μl      加ddH2O至 50 μl 视PCR仪有无热盖，不加或添加石蜡油。 2：调整好反应程序。将上述混合液稍加离心，立即置PCR仪上，执行扩增。一般：在93℃预变性3-5min，进入循环扩增阶段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循环30-35次，在72℃ 保7min。 3：伴放线放线杆菌探针法荧光定量PCR试剂盒结束反应，PCR产物放置于4℃待电泳检测或-20℃长期保存。 4：PCR的电泳检测：如在反应管中加有石蜡油，需用100μl进行抽提反应混合液，以除去石蜡油；否则，直接取5-10μl电泳检测。 下列相关产品： 鹌鹑源性成分探针法荧光定量PCR试剂盒

鹌鹑支气管炎病毒探针法荧光定量PCR试剂盒

奥尔森派琴虫探针法荧光定量PCR试剂盒

奥斯特奥斯特线虫PCR检测试剂盒 实时荧光定量PCR： 实时荧光定量PCR技术有效地解决了传统定量只能终点检测的局限，实现了每一轮循环均检测一次荧光信号的强度，并记录在电脑软件之中，通过对每个样品Ct值的计算，根据标准曲线获得定量结果。因此，实时荧光定量PCR无需内标是建立在两个基础之上的： 1）Ct值的重现性PCR循环在到达Ct值所在的循环数时，刚刚进入真正的指数扩增期（对数期），此时微小误差尚未放大，因此Ct值的重现性，即同一模板不同时间扩增或同一时间不同管内扩增，得到的Ct值是恒定的。 2）Ct值与起始模板的线性关系由于Ct值与起始模板的对数存在线性关系，可利用标准曲线对未知样品进行定量测定，因此，实时荧光定量PCR是一种采用外标准曲线定量的方法。 外标准曲线的定量方法相比内标法是一种准确的、值得信赖的科学方法。利用外标准曲线的实时荧光定量PCR是迄今为止定量最准确，重现性定量方法，已得到，广泛用于基因表达研究、转基因研究，药物疗效考核、病原体检测等诸多领域。 定量PCR方法： a、竞争法 选择由突变克隆产生的含有一个新内切位点的外源竞争性模板。在同一反应管中，待测样品与竞争模板用同一对引物同时扩增（其中一个引物为荧光标记）。扩增后用内切酶消化PCR产物，竞争性模板的产物被酶解为两个片段，而待测模板不被酶切，可通过电泳或高效液相将两种产物分开，分别测定荧光强度，根据已知模板推测未知模板的起始拷贝数。 b、内参照法 在不同的PCR反应管中加入已定量的内标和引物，内标用基因工程方法合成。上游引物用荧光标记，下游引物不标记。在模板扩增的同时，内标也被扩增。在PCR产物中，由于内标与靶模板的长度不同，二者的扩增产物可用电泳或高效液相分离开来，分别测定其荧光强度，以内标为对照定量待检测模板。 c、PCR－ELISA法 利用di高辛等标记引物，扩增产物被固相板上特异的探针所结合，再加入抗di高辛酶标抗体－辣根过氧化物酶结合物，最终酶使底物显色。常规的PCR－ELISA法只是定性实验，若加入内标，作出标准曲线，也可实现定量检测目的。 下列是公司正在销售的产品： Lgr5/GPR49 肠上皮干细胞蛋白(多肽)Multi-class antibodies规格： 0.5mg

Anti-AGEs 晚期糖基化终末产物抗体Multi-class antibodies规格： 0.1ml

Rhesus antibody Rh Phospho-CaMKII (Thr286) 0酸化钙/钙调素依赖蛋白激酶2α抗体 规格 0.1ml

Avidin阻挡剂 10ml Sigma原料

VANGL2 英文名称： 神经管畸形相关蛋白VANGL2抗体 0.2ml

DMAP1 英文名称： DNA甲基转移酶相关蛋白1抗体 0.2ml

Anti-AGEs 晚期糖基化终末产物抗体Multi-class antibodies规格： 0.1ml

Serum Amyloid P： 血清淀粉样蛋白P成份抗体 0.1ml

ENPP3： ENPP3抗体IgG 0.1ml

胰十二指肠同源异型盒基因抗体 anti-Pdx1 0.1ml

Anti-SSTR1/FITC 荧光素标记受体1(SSTR1)抗体IgGMulti-class antibodies规格： 0.2ml

Rhesus antibody Rh phospho-Na+/K+-ATPase Alpha1(Ser 943) 0酸化ATP酶α1多肽抗体 规格 0.2ml

AMPK Beta1 (AMP-activated Protein Kinase beta-1) 腺苷单0酸活化蛋白激酶β1抗原Multi-class antibodies规格： 0.5mg 马虻PCR检测试剂盒小鼠胰岛素样蛋白5(INSL5)ELISA试剂盒 ，英文名： INSL5 ELISA Kit

兔子白介素6(IL-6)ELISA检测试剂盒rabbitIerleukin6,IL-6ELISAKit 96T/48T

犬胆囊收缩素/缩胆囊素八肽(CCK-8)免疫试剂盒 Canine cholecystokinin octapeptide,CCK-8 ELISA Kit

英文名称HumanAOPPELISAKit人晚期氧化蛋白(AOPP)规格：96T/48T

大量腺病毒树脂法高级化试剂盒1次

Ratiestinalfattyacidbindingprotein,iFABPELISA试剂盒大鼠肠脂肪酸结合蛋白(iFABP)ELISA试剂盒规格：96T/48T 操作流程: 1.从室温平衡20min后的铝箔袋中取出所需板条，剩余板条用自封袋密封放回4℃。 2.设置标准品孔和样本孔，标准品孔各加不同浓度的标准品50μL； 3.样本孔中加入待测样本50μL；空白孔不加。 4.除空白孔外，标准品孔和样本孔中每孔加入辣根过氧化物酶（HRP）标记的检测抗体100μL，用封板膜封住反应孔，37℃水浴锅或恒温箱温育60min。 5.弃去液体，吸水纸上拍干，每孔加满洗涤液（350μL），静置1min，甩去洗涤液，吸水纸上拍干，如此重复洗板5次（也可用洗板机洗板）。 6.每孔加入底物A、B各50μL，37℃避光孵育15min。产品仅用于科研实验 7.每孔加入终止液50μL，15min内，在450nm波长处测定各孔的OD值。